杂质分析方法与验证-中科重点实验室

杂质分析方法与验证-中科重点实验室

中科广州化学研究所分析测试中心

(广州中科技术服务有限公司)

杂质分析方法的研究与验证

方法选择的一般考虑

杂质

挥发性杂质

残留溶剂

HS-GC

其它

GC- MS

**杂质

RP-HPLC

不同器

梯度洗脱

互补方法

HPCE

HPTLC

HPGPC

颜色控制

无机杂质

ICP-MS 离子色谱

方法研究建立 ü

说明方法来源及方法选择、优化的建立过程           

文献（药典）方法 、文献方法修改 、方法的选择、优化… ü

采用方法如系文献（药典）方法的修改，说明充分依据 v    

文献方法缺陷、本品杂质谱出现了不同… ü

与国内外药典同（类、品种分析方法进行效能和优势的试、验对比或对比论证 v   

专属性、杂质控制针对性、灵敏度、准确度… v   

对相同多批样品结果的对比  差异及分析… v    

科学分析—说明拟用方法对相应的适用性及优势

方法学验证

目的 通过设计并实施科学合理的试验，证明采用的方法 适合于相应的要求。

一般原则 原则上各项目的分析方法，均需要进行方法验证 ? 方法验证的内容应根据项目的要求，结合所采用 分析方法的特点确定。 ?

同一分析方法用于不同的项目有不同的验证要求

验证项目与内容

? 专属性、线性、范围、准确度、精密度、限、定 量限、耐用性、系统适用性等。

专属性：在其他成分（如杂质、降解物、辅料等） 可能存在下，采用的分析方法能够正确、检出被分 析物质的特性

? 典型图谱并标注 v

分离度－色谱方法专属性常用的量化指标。 峰-谷比值 v

杂质可得→较难分离物质对的分离试验、粗品中间体分离 试验、杂质及主成分的分离试验  临界分离度 v

杂质不可得→强制降解试验、与另一成熟方法比对、峰纯 度－DAD、MS，改变流动相比例，观察峰分离情况 。

方法不够专属时，多个方法予以补充

－多肽药物有关物质：

线性：在设计范围内，响应值与待测物质量之间 成正比例关系的程度

范围：方法能达到一定精密度、准确度和线性的高、 低浓度或量的区间。

相关系数、截距、斜率、剩余方差以及数据、图表。

 ?含量测定：测试浓度的80％－120％或更宽。 ?

制剂含量均匀度：测试浓度的70％－130％。必要时，气雾 剂、喷雾剂，范围可适当放宽。 ?

溶出度、释放度：为限度的±20％；或下限的-20％至上限 的+20％。释放度： 0－110％。 ?

杂质：定量限（限）至标准限度的120％。

 灵敏度：试样中能被（或定量）的较低量。

 限及定量限 ?

 信噪比、直观评价、响应值的标准差和斜率

 －HPLC中常用信噪比的方法，但有一定局限。有特殊要求时 ，单独进样标准低浓度对照品溶液（如限度一半）  

－中调节仪器积分阈很重要。  

－HPLC灵敏度与波长（手段）及流动相组成密切相关。

准确度：测定结果与真实值或参考值接近 程度。 ü

 －已知杂质：回收率（定量限至标准限度的120％ ） 、根据（精密度、专属性、线性）推断  ü

－未知杂质：与另一成熟方法比对、质量平衡原理粗 略判定、几种不同色谱条件或测定原理方法的测定结 果比对。

精密度：在规定的测试条件下，同一个均匀样品经多次取样测 定所得结果之间的接近程度。 SD、RSD和置信区间

－重复性、中间精密度、重现性（标准化分析方法时需要）

 耐用性：指测定条件有小的变动时，测定结果不受影响的承受 程度。

－HPLC法：流动相的组成比例及pH值、不同厂家或批号的色谱柱、 柱效、柱温、流速等及被测溶液的稳定性、样品提取的次数和时 间等。  －TLC法：适当改变展开剂比例及pH值，考察耐用性。  

中国科学院广州化学研究所分析测试中心

(广州中科技术服务有限公司)